本试剂盒仅限用于科学研究，严禁用于医学诊断。本文将介绍人巨噬细胞炎性蛋白5（MIP-5）ELISA试剂盒的检测原理以及样本处理方法。

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。首先，将标本、标准品和HRP标记的检测抗体依次加入已经包被adropin（AD）抗体的微孔中，经过孵育及彻底洗涤后，使用TMB底物进行显色反应。在过氧化物酶的催化下，TMB会从蓝色转变为最终的黄色，颜色的深浅与样品中的adropin（AD）浓度成正相关。最后，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），进而计算样品的浓度。

样本收集、处理及保存方法

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，避免任何细胞刺激。收集血液后，以3000转离心10分钟迅速分离血清与红细胞。

2. 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝。在3000转离心30分钟后取上清。

3. 细胞上清液：以3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织与适量生理盐水混合后捣碎，随后以3000转离心10分钟获取上清。

5. 保存：若样本收集后未能立即检测，请按单次使用量分装，存放于-20℃，避免多次冻融，并在室温下解冻时确保样品充分均匀。

操作注意事项

试剂盒组成说明：标准品（S0-S5）浓度依次为0、25、50、100、200、400 pg/mL。

试剂的准备与洗板方法

20×洗涤缓冲液的稀释：将蒸馏水以1:20比例稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

结果判断及标准曲线绘制

在Excel工作表中，以标准品浓度为横坐标，对应的OD值为纵坐标，绘制标准品的线性回归曲线，并按照曲线方程计算各样本的浓度值。

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