尊龙凯时的实验方法原理:本染色法是基础的生物染色技术,适用于标本涂片或菌落涂片。通过染色结果,可以将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两大类。
实验步骤
一、实验试剂:
1. **结晶紫溶液:**
A液:结晶紫 2g,95%乙醇 20ml。
B液:草酸铵 0.8g,蒸馏水 80ml。
在使用前24小时,将A液与B液混合,过滤后装入试剂瓶中备用。
2. **碘液:**
碘 1g,碘化钾 2g,蒸馏水 300ml。
将碘与碘化钾混合研磨,加入少许蒸馏水以助其溶解,研磨至完全溶解后补足水量。或者,可以先将碘化钾完全溶解后,再加入碘片,待完全溶解后,加水至300ml。
3. **脱色液:** 95%乙醇。
4. **复染液:**
A. 储存液:沙黄 25g,95%乙醇 100ml。
B. 应用:将A液 10ml与蒸馏水 90ml混合。
菌片制备:
染色的第一步是制作涂片。当制作菌液涂片时,使用接种环蘸取菌液,点在载玻片上。如果是菌落涂片,先取一滴生理盐水置于玻片上,使用接种针挑取菌落并在盐水中涂布。在涂片时需轻柔操作,避免猛烈的动作导致细胞排列变化或细菌鞭毛脱落,从而影响结果的准确性。制备好的涂片需自然干燥,并经过火焰固定,固定时应控制温度,以避免细胞形态变化。固定后的涂片将进行染色处理。
二、染色方法:
1. 涂片经过火焰固定后,加入结晶紫液染色1分钟,然后用清水冲去染液。
2. 添加碘液继续染色1分钟,水洗。
3. 加入脱色液,轻轻摇动约30秒,直到不再脱落紫色为止,随后水洗。
4. 加入复染液染色30秒,水洗。
5. 待干后进行镜检。
通过尊龙凯时的染色法,科研人员能够更加清晰地观察细菌的分类,提升实验室的检测与分类效率。