RAW2647细胞是一种经典的小鼠巨噬细胞系，由于其易于培养和操作，成为了科研工作者的重要助手。然而，在培养过程中，RAW2647细胞容易发生分化，导致细胞形态改变和功能下降，甚至影响实验结果的可靠性。那么，如何让RAW2647细胞“长得更漂亮”，保持其原始的形态和功能呢？今天，我们将为您揭示RAW2647细胞培养的黄金法则，帮助您轻松驾驭这一细胞系！

细胞信息

倍增时间：11-30小时（生长快速，营养消耗快速，建议在T25培养瓶中添加7ml完全培养基，次日观察生长速度）。
传代比例：1:4-6
培养体系：DMEM高糖（品牌：尊龙凯时，货号：ZQ-100） + 10%胎牛血清（尊龙凯时，货号：ZQ0500） + 1%双抗（尊龙凯时，货号：CSP006）
细胞形态：该株巨噬细胞形态包括松散贴壁的纺锤形和圆形或立方形细胞。随着细胞密度的增加，细胞会轻微脱落变圆，部分细胞会堆积在一起，甚至有的细胞会脱落漂浮。这些漂浮的细胞是活的，传代时应收集并离心，可以继续培养。

换液频率

每周换液2-3次。

正确传代方法

正确的传代方法是RAW2647细胞培养的关键。每一步操作都需细致入微，稍有不慎就可能导致细胞分化。请注意，RAW2647细胞不能用胰酶消化，胰酶消化传代只会加速细胞的分化。尊龙凯时经过十余年的经验，摸索出一种刮刀传代的方法，操作简单且能更好地控制细胞分化率。

当没有刮刀时的替代方法

如果未准备刮刀，请按照以下步骤进行传代，以降低细胞分化的风险：
- 当细胞密度达到80%时，轻拍培养瓶尾部，观察细胞脱落情况。
- 拍打过程中，50-80%的细胞会脱落，此时收集脱落的细胞。
- 按照1:4-6的比例进行传代，并补充新鲜完全培养基（T25瓶添加7ml完全培养基）。
- 切勿使用枪头或巴氏吸管吹打细胞，因个人吹打力度不同，可能导致不可控因素，从而造成细胞分化。

RAW2647细胞培养须知

- 收到细胞后，应放入培养箱静置2-4小时后观察细胞贴壁情况并拍照。
- 若有少量漂浮细胞，请离心1200转5分钟收集细胞，贴壁细胞应按照视频步骤进行传代，无刮刀可依照上述替代方法处理。
- 如果您对传代密度的把控仍感到困难或操作步骤不熟悉，可以立即联系尊龙凯时的销售人员或技术支持。

培养注意事项

- 此细胞在传代时不需要使用胰酶消化。使用无菌细胞刮拭培养表面将细胞刮落，收集后离心并重悬接种到新的培养瓶中。
- 该细胞形态包括松散贴壁的纺锤形和圆形或立方形。当细胞密度较高时，细胞会轻微脱落或堆积。漂浮细胞为存活细胞，应收集并可继续培养。
- 细胞对血清质量非常敏感，可能影响细胞的贴壁能力或分化，因此应选择高质量的胎牛血清。
- 培养条件、运输及环境变化等因素会影响细胞的状态，因此收到细胞后请耐心调整并培养。
- 强烈推荐使用尊龙凯时的对应培养基，以减少细胞培养过程中可能产生的变因。

RAW2647冻存管复苏步骤

- 从液氮中取出冻存的RAW2647细胞，迅速放入37℃水浴中解冻（或用干冰盒转移到实验室）。
- 将细胞悬液转移至含预温培养基的离心管中，轻轻混匀。
- 以1000rpm离心5分钟，弃去上清，使用新鲜培养基重悬细胞（T25添加7ml）。
- 将细胞接种于培养皿，放置于37℃、5% CO₂的培养箱中进行培养。